Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС) является одной из широко распространённых вирусных природно-очаговых инфекций в мире [1][2]. Ежегодно во всем мире регистрируют более 200 000 случаев [3].

На территории РФ заболеваемость ГЛПС занимает одно из лидирующих мест среди всех природно-очаговых инфекций. Циркуляция возбудителя хантавирусов установлена на территориях всех федеральных округов России, наиболее эпидемически активные природные очаги выявлены в европейской части России, на них приходится до 98% подтверждённых случаев ГЛПС (от общего количества в стране), на Сибирский и Дальневосточный регионы — 2% случаев [4][5][6]. В европейской части России заболеваемость в основном ассоциирована с вирусами Puumala и Dobrava-Belgrade, на Дальнем Востоке — с Hantaan, Amur и Seul [7][8].

Различные виды вирусов, возбудителей ГЛПС, имеют тесные связи со своими природными носителями, превращая их в естественные резервуары, представляющие источник инфекции для человека. Видовой состав животных, инфицированных хантавирусами, в различных регионах мира на сегодняшний день насчитывает 84 вида из 14 семейств млекопитающих. В РФ на долю рыжей полевки (основного носителя хантавирусов) приходится более половины всех выявленных положительных проб, на долю инфицированных проб от полевой мыши (Apodemus agrarius) — 8,5 %. Единичные инфицированные особи выявлены при исследовании материала от кавказской и восточноазиатской мыши (Apodemus ponticus, Apodemus peninsulae), серой крысы (Rattus norvegicus) [6]. Кроме того, антиген хантавируса обнаружен у 16 видов птиц [9][10].

В последнее время наблюдается тенденция расширения границ природных очагов с вовлечением новых субъектов, ранее считавшихся свободными от этой инфекции. Циркуляция хантавирусов подтверждена на юге европейской части России, на территории Волгоградской и Астраханской областей, Ставропольского и Краснодарского краев, республик Адыгея, Калмыкия и Крым [11][12][13], большая часть которых сопредельна с Ростовской областью (РО). Первый лабораторно подтвержденный в ИФА случай болезни в области был зарегистрирован в Песчанокопском районе в 2018 г., в последующем один больной выявлен в Сальском районе в 2019 г. [14]. В период 2020–2021 гг. нет официальных данных о случаях ГЛПС в РО [4][15]. В 2022 г. в городах Ростов-на-Дону и Таганрог зарегистрировано два случая болезни. Референс-центром по мониторингу за геморрагической лихорадкой с почечным синдромом РО отнесена ко второй группе, с низким уровнем заболеваемости (с диапазоном показателей заболеваемости от 0,05 до 0,91 на 100 тыс. населения) [16].

Обследование реконвалесцентов с давностью заболевания от 5 до 25 лет позволило установить наличие антител к хантавирусу у 98 % обследованных лиц в республике Башкирия и у 95 % — в Приморском крае, что указывает на длительный, пожизненный иммунитет к этой инфекции [8]. Серологические исследования состояния популяционного иммунитета к возбудителям ГЛПС проводили в ряде субъектов РФ. Наиболее высокий уровень серопозитивных сывороток отмечен в Приморском крае — 28,6%, Самарской области — 27,0%, Республике Коми — 13,4%, Ульяновской — 10,6%, Свердловской — 10%, Челябинской — 9,1%, Еврейской автономной — 8,2%, Тульской — 8,07% областях [13].

Отмечена тесная корреляция при обнаружении инфицированных хантавирусом мелких млекопитающих (ММ) и серопозитивных к этому вирусу лиц среди населения административных территорий, где проводились параллельные исследования ММ и людей. Благодаря серологическому обследованию людей с заболеваниями, сходными по некоторым симптомам с ГЛПС, в ряде районов России, в которых ранее не регистрировалась ГЛПС, были выявлены больные этой инфекцией [17][18]. Многообразие клинических проявлений определяет высокую значимость специфической диагностики ГЛПС. Иммунологические методы являются основными в лабораторной диагностике [19][20].

Цель исследования — оценка эпизоотолого-эпидемиологической ситуации по ГЛПС в Ростовской области.

Полевой материал и формирование проб от ММ для лабораторного исследования проводили в соответствии с действующими нормативными документами СП 3.1.7.2614-10; СанПиН 3.3686-21 в течение 2020 – 2022 гг. в границах 35 административных районов РО и окрестностях г. Ростов-на-Дону (СП 3.1.7.2614-10. Профилактика геморрагической лихорадки с почечным синдромом: Санитарно-эпидемиологические правила. - М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010 от 26.04.2010. № 38.-15 с.; СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней»).

В 2020 г. отловлены и исследованы 356 экз. млекопитающих семи видов: обыкновенная полёвка (Microtus arvalis), малая лесная мышь (Sylvaemus uralensis), домовая мышь (Mus musculus), общественная полёвка (Microtus socialis), желтогорлая мышь (Sylvaemus flavicollis), малая белозубка (Crocidura suaveolens), европейская лесная мышь (Sylvaemus sylvaticus).

В 2021 г. исследовано 422 экз. грызунов, насекомоядных и зайцеобразных 14 видов: домовая мышь, европейская лесная мышь, малая лесная мышь, восточноевропейская полёвка (Microtus rossiaemeridionalis), малая белозубка, курганчиковая мышь (Mus spicilegus), общественная полевка, обыкновенная бурозубка (Sorex araneus), серый хомячок (Cricetulus migratorius), заяц-русак (Lepus europaeus), желтогорлая мышь, желтобрюхая мышь (Sylvaemus fulvipectus), обыкновенная полёвка, рыжая полёвка (Myodes glareolus).

В 2022 г. исследовано 1379 особей 14 видов: малая белозубка, малая бурозубка (Sorex minutus), обыкновенная бурозубка, домовая мышь, желтогорлая мышь, курганчиковая мышь, европейская лесная мышь, малая лесная мышь, обыкновенная полёвка, восточноевропейская полёвка, рыжая полёвка, серый хомячок, желтобрюхая мышь, общественная полёвка.

Объекты эпизоотологического мониторинга объединяли в пробы с учётом вида животного, места отлова и даты сбора. Все стадии исследования соответствовали МР 3.1.7.0250-21 «Эпидемиология. Профилактика инфекционных болезней. Инфекции, общие для человека и животных тактика и объемы зоологических работ в природных очагах инфекционных болезней», международным этическим нормам, нормативным документам по биоэтике. Наличие антигенов хантавирусов в пробах ММ определяли методом ИФА, с использованием ИФА тест-системы «ХАНТАГНОСТ» (производство ФГУП «Предприятие по производству бактериальных и вирусных препаратов Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова») в соответствии с инструкцией производителя.

Мониторинговое исследование иммунной прослойки здоровых доноров жителей РО в течение 2020–2022 гг. осуществляли методом ИФА. Биоматериал получен в соответствии с принципами законности, соблюдения этических норм, открытости. Всего протестировано 1062 образца крови жителей различных регионов области.

В сыворотках крови определяли иммуноглобулины класса G (IgG) к хантавирусам. Пробы, в которых обнаруживались IgG, дополнительно исследовали на наличие иммуноглобулинов класса М (IgM). В работе использовали тест-системы производства «Вектор-Бест» (г. Новосибирск) «ВектоХанта-IgG» и «ВектоХанта-IgМ», согласно инструкции производителя. Положительными считали только образцы с оптической плотностью (ОП) образца ≥ ОП критической (коэффициент позитивности КП ≥ 1). Тест-системы специфичны к основным эпидемически значимым хантавирусам субтипов HANV, SEUV, PUUV и DOBV. Результаты реакции учитывали на регистрирующем фотометре Infinite F50 (TECAN, Австрия).

Доверительные интервалы для доли положительных проб определяли по методу Уилсона при доверительной вероятности p³0,95 с использованием программных средств, предоставляемых на сайте https://epitools.ausvet.com.au.

Для оценки современного состояния активности природных очагов ГЛПС в РО проанализированы данные эпизоотологического мониторинга, осуществляемого сотрудниками Ростовского противочумного института в 2020–2022 гг., результаты представлены в таблице 1. Всего собрано 2157 экземпляров ММ (15 видов), обследовано 35 административных районов области и окрестности г. Ростов-на-Дону.

В 2020 г. на 13 административных территориях отловлены и исследованы 356 экз. млекопитающих семи видов, объединённых в 155 проб. Антиген возбудителей ГЛПС выявлен в 11 пробах (табл. 1), инфицированность вирусом мелких мышевидных грызунов составила 7,1 % [ 4,0–12,3]. Положительные находки обнаружены в шести пробах домовой мыши в Азовском, Пролетарском, Мясниковском, Неклиновском районах, двух пробах полёвки обыкновенной в Сальском районе, двух пробах — мышь европейская лесная в Азовском и Неклиновском районах, одной пробе — малая лесная мышь в Азовском районе.

В 2021 г. эпизоотологический мониторинг проведен на 25 административных территориях РО (табл. 1). За период исследования отловлено 422 экз. (215 проб) ММ 14 видов. Положительные находки обнаружены в шести пробах в четырех районах области: Сальском (полёвка обыкновенная — две пробы, желтобрюхая мышь — одна проба), Обливском (мышь малая лесная — одна проба), Морозовском (полёвка обыкновенная — одна проба), Неклиновском (мышь европейская лесная — одна проба). По данным ИФА, заражённость ММ достигает 2,8% [ 1,3–6,0] (шесть положительных находок) трёх видов: полёвка обыкновенная, мышь желтобрюхая, мышь европейская лесная.

В 2022 г. мониторинг проведён на 31 административной территории РО (табл. 1). Отловлено 1379 экз. (307 проб) ММ 14 видов. Маркеры возбудителей ГЛПС обнаружены в трёх районах области: Неклиновском (полёвка восточноевропейская), Кашарском (мышь малая лесная, полёвка обыкновенная), Матвеево-Курганском (полёвка обыкновенная). Спонтанная инфицированность в 2022 г. выявлена в 1,3% [ 0,7–3,8] проб (5 положительных находок) трёх видов ММ: полёвка восточноевропейская, мышь малая лесная, полёвка обыкновенная.

Для оценки распространения хантавирусов на территории РО в 2020–2022 гг. проанализированы результаты серологического мониторинга состояния популяционного иммунитета к хантавирусам. Результаты исследований отражены в табл. 2.

В 2020 г. антитела класса G у здоровых доноров (n = 186) обнаружены в 7,0 % [ 4,1–11,6] проб. Среди серопозитивных лиц преобладали жители сельских районов и небольших городов, проживающие в частных домовладениях с приусадебными хозяйствами. Положительные пробы выявлены в Ремонтненском (13,5%) и Сальском (12,2%) районах, г. Волгодонск (2,1%), медианный возраст серопозитивных доноров составил 50 лет, среди которых преобладали женщины — 57,1 %. Ни в одной из проб не обнаружено одновременное присутствие IgM и IgG к ГЛПС.

В 2021 г. исследованы 424 сыворотки крови жителей, проживающих на территории трёх административных районов (Сальского, Неклиновского, Азовского) и семи городских округов (Ростов-на-Дону, Шахты, Таганрог, Каменск-Шахтинский, Волгодонск, Зерноград, Морозовск), население которых составляет 52,7% от общего населения РО. Доля серопозитивных результатов составила 4,5 % [ 2,9–6,9]. Наличие серологических маркеров к возбудителям ГЛПС выявлено на различных территориях с частотой от 1,9% до 12,2% (табл. 2). Антитела класса G к хантавирусам обнаружены в следующих городах: Таганрог — 12,2 %, Морозовск — 11,8 %, Шахты — 5,4 %, Зерноград — 5,0 %. Единичные случаи регистрировали в городах Ростов-на-Дону, Каменск-Шахтинский, Волгодонск. Всего обнаружено 19 положительных проб. Медианный возраст серопозитивных доноров составил 54 года, из которых 63,2 % мужчины. В двух пробах одновременно присутствовали антитела классов М и G (г. Зерноград — женщина 20 лет, г. Морозовск — мужчина 60 лет), что может говорить об остром периоде заболевания.

В 2022 г. исследовано 452 сыворотки крови, полученных из ряда районов области и г. Ростов-на-Дону. Сероположительные результаты обнаружены у 7,1% [ 5,1–9,8] доноров, проживающих в: Ремонтненском — 15,7 %, Неклиновском — 14,3 %, Сальском — 12,9 % районах и г. Ростов-на-Дону — 4,3 %. Единичные положительные пробы регистрировали в Весёловском и Целинском районах. Медианный возраст серопозитивных доноров — 51,5 лет, из которых мужчин — 59,4 %.

При параллельном исследовании IgG положительных проб на наличие иммуноглобулинов класса М, результаты совпали в 46,9% (15 случаев), что может свидетельствовать о высокой доле людей, возможно, перенёсших болезнь в лёгкой форме. Такие совпадения были обнаружены в Неклиновском, Сальском, Ремонтненском районах и г. Ростов-на-Дону. Средний возраст доноров, подозрительных на контакт с хантавирусом, составил 44,5 года. К сожалению, данное исследование проводилось ретроспективно, что не позволяет с уверенностью установить диагноз хантавирусной инфекции.

Скрининг здорового населения на наличие специфических антител к хантавирусам и эпизоотологический мониторинг мелких млекопитающих на присутствие хантавирусного антигена показал распространение возбудителей ГЛПС на территории РО (рис. 1).

В процессе исследований антитела к хантавирусам выявлены у жителей 14 административных территорий. Обнаружение на большинстве из этих территорий носителей с антигенами хантавирусов даёт возможность предположить инфицирование жителей хантавирусами. Визуализация результатов показала совпадение серопозитивных проб и положительных находок в ММ в Азовском, Каменском, Неклиновском, Сальском, Морозовском районах. Вышеперечисленные факторы свидетельствуют о рисках инфицирования населения и осложнения эпидемиологической ситуации по ГЛПС в РО.

В результате эпизоотологического мониторинга обнаружены маркеры возбудителей ГЛПС в Азовском, Каменском, Кашарском, Матвеево-Курганском, Морозовском, Мясниковском, Неклиновском, Обливском, Пролетарском, Сальском районах. Зарегистрирована инфицированность хантавирусами шести видов млекопитающих (мышь домовая, полёвка обыкновенная, мышь желтобрюхая, мышь европейская лесная, полёвка восточноевропейская, мышь малая лесная). Доля инфицированных ММ отловленных в период 2020–2022 гг. составила 7,1%, 2,8%, 1,3% соответственно. В Неклиновском районе положительные пробы в ММ выявляли в течение трёх лет наблюдения, в Сальском — в 2020 и 2021 гг. Обнаружение маркеров хантавирусов в популяциях грызунов позволяет предположить циркуляцию инфекционного агента в Ростовской области.

Население сельских районов и городов РО имеет контакт с хантавирусами, что подтверждено в результате серологического мониторинга выявлением IgG у здоровых доноров в 2020–2022 гг. в 7,0%, 4,5% и 7,1% проб соответственно. Положительно реагирующие доноры относятся к возрастной группе лиц активного трудового возраста от 41 года и старше.

Совпадение на территориях Азовского, Каменского, Неклиновского, Сальского, Морозовского районов положительных находок антигена хантавирусов в пробах ММ и серопозитивных проб доноров позволяют предположить наличие природного очага ГЛПС.

Регистрация случаев болезни людей ГЛПС в 2018, 2019 и 2022 гг., анализ результатов исследований иммунной прослойки населения по отношению к вирусам–возбудителям ГЛПС и данных о выявлении маркеров вируса в пробах носителей позволяют предположить наличие на территории РО природного очага ГЛПС, границы и активность которого нуждаются в уточнении, а также реальную опасность заражения населения, проживающего на этих территориях.

Для заключения о степени активности природного очага необходимы дальнейшие исследования его биоценотической и пространственной структуры, выделение и характеристика циркулирующих хантавирусов, а также изучение динамики иммунного ответа у лихорадящих больных людей с подозрением на хантавирусную инфекцию.