Сегодня учёные и практические специалисты, занимающиеся профилактикой инфекционных заболеваний, рассматривают бруцеллёз как один из наиболее опасных зоонозов. Необходимо принимать во внимание то, что официальные сведения далеко не исчерпывают всех данных об интенсивности проявлений этой ин фекции у отдельных видов скота. Ежегодно более чем в 170 странах мира регистрируется свыше 500 000 новых случаев заболевания людей бруцеллёзом [1]. Кроме того, он признан одной из самых распространенных в мире инфекций, с высокой вероятностью заражения в лабораторных и производственных условиях. Примером является вспышка этого заболевания в 2019 г. среди людей в Китае в г. Ланьчжоу, произошедшая на заводе по производству вакцин против бруцеллёза. В результате биологической аварии возник выброс во внешнюю среду аэрозоля, содержащего живые бруцеллы. После обследования более 55000 человек было выявлено 6620 положительно реагирующих на бруцеллёз.

В Российской Федерации за последние 10 лет эпидемическая ситуация по бруцеллёзу охарактеризована как неблагополучная с тенденцией к снижению заболеваемости. В период 2011 – 2020 гг. зарегистрировано 3508 случаев впервые выявленного бруцеллёза среди людей. Осложнения эпидемиологической ситуация по этой инфекции обусловлены эпизоотическим неблагополучием среди крупного (КРС) и мелкого (МРС) рогатого скота. По данным Минсельхоза России в период с 2010 по 2020 гг. в Российской Федерации было зарегистрировано 4283 неблагополучных пункта (н.п.) по бруцеллёзу КРС, в которых выявлено 95979 голов больных животных, и 398 н.п. по бруцеллёзу МРС, в которых обнаружено 15880 инфицированных больных овец и коз. Анализ заболеваемости сельскохозяйственных животных свидетельствует о сохранении многолетнего восходящего тренда эпизоотологического неблагополучия по бруцеллёзу КРС в России1.

К основным причинам стойкого эпизоотического неблагополучия по бруцеллёзу в РФ относят несоблюдение ветеринарных требований при приобретении, реализации и содержании сельскохозяйственных животных, включающие нарушения ветеринарных правил по обследованию скота на бруцеллёз и вакцинированию против бруцеллёза, несанкционированное перемещение больного скота по административной территории страны, отсутствие должного контроля со стороны муниципальных органов за регистрацией поголовья (особенно в частном секторе), несвоевременная сдача больных животных на убой, наличие не выявленных эпизоотических очагов и бруцеллоносителей.

На фоне длительного эпизоотического неблагополучия уровень заболеваемости людей бруцеллёзом в последние годы стабилизировался. Наибольшее число заболевших регистрируется в административных субъектах СКФО, ЮФО и СФО, которые имеют максимальный уровень заболеваемости КРС (более 80% от общего количества больных животных в РФ) и МРС (более 90 %). В зоне повышенного риска по заболеваемости бруцеллёзом остаются индивидуальные владельцы животных, лица, профессионально связанные с животноводством, переработкой продукции и сырья, получаемого от животных.

Основным источником возбудителя инфекции является бруцеллёзный КРС и МРС, ведущими путями передачи – контактный и алиментарный. Заражение людей происходит в результате тесных контактов с больными животными (при уходе за скотом, оказании ветеринарной помощи, убое и разделке таких животных, а также употреблении в пищу контаминированной бруцеллами мясомолочной продукции без достаточной термической обработки). Основными патогенными видами рода Brucella, способными вызывать серьёзные эпизоотические и эпидемические осложнения являются B. melitensis, B. abortus, и B. suis. Во всем мире B. melitensis считается видом, вызывающим наиболее тяжёлые и острые формы инфекции. Этот вид встречается в 80 – 90% случаях бруцеллёза у человека.

Цель настоящего обзора – анализ данных литературных источников по истории применения, по специфической профилактике бруцеллёза и проблемы создания новых безопасных и эффективных вакцин против бруцеллёза для иммунизации людей и животных.

За более чем вековую историю борьбы с эпизоотиями бруцеллёза в мире были выработаны две наиболее эффективные стратегии снижения заболеваемости и искоренения инфекции, такие как создание у восприимчивого поголовья с помощью вакцин специфического иммунитета, а также ликвидация источника инфекции, который выявляют при проведении плановых и диагностических исследований по эпизоотологическим показаниям. Выбраковку серопозитивных по бруцеллёзу животных использовали (и используют) в ряде развитых стран Европы и Америки. Такой метод борьбы с заболеванием эффективен только в условиях высокой культуры животноводства2. В регионах со слабым зоотехническим учётом поголовья общественного и частного сектора, особенно при использовании технологии отгонного скотоводства, при интенсивном перемещении животных между стадами, практически невозможно наладить эффективную систему выявления инфицированного скота. Ветеринарные службы часто сталкиваются с ситуацией, когда через 2 – 3 дня после взятия крови для лабораторных исследований не удаётся найти установленных в результате проведённого обследования серопозитивных животных. В подобных условиях основным средством борьбы с бруцеллёзом становится вакцинация [2].

Ряд авторов придерживается мнения, что для неблагополучных по бруцеллёзу регионов, где искоренение инфекции с тотальной заменой больного поголовья на здоровый скот невозможно по социально-экономическим причинам, массовая вакцинация является основной мерой борьбы с бруцеллёзом животных и ключевым элементом в системе3 профилактики инфекции у людей [3 – 6].

Из-за существенных экономических потерь и угрозы здоровью населения, к которым приводит бруцеллёз, принимаются меры по предотвращению распространения инфекции с помощью вакцинации животных, так как высокая заболеваемость населения связана с распространением инфекции среди домашнего скота, а также употреблением заражённых молочных продуктов и мяса. В связи с этим были разработаны новые ветеринарные правила, вступившие в силу с 1 марта 2021 г. и действующие до 1 марта 2027 г. 1 сентября 2021 г. вступят в силу новые СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней»3 4.

Вакцинация признана ВОЗ результативным методом профилактики инфекционных заболеваний человека. Высокая эффективность, простота, возможность широкогоохвата вакцинируемых лиц с целью массового предупреждения заболевания вывели активную иммунопрофилактику в большинстве стран мира в разряд государственных приоритетов. Комплекс мероприятий по вакцинации включает отбор лиц, подлежащих вакцинации, выбор вакцинного препарата и определение схемы его использования, а также (при необходимости) контроль эффективности, купирование возможных патологических реакций и осложнений [7].

Для иммунизации людей против бруцеллёза у нас в стране применяется живая вакцина, приготовленная из вакцинного штамма B. abortus 19-ВА. Технология изготовления была разработана в 50-х гг. прошлого столетия в НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи под руководством академика П.А. Вершиловой5.

Учёные во всем мире многие годы стремятся создать эффективные вакцины для иммунизации человека от бруцеллёза в связи с тем, что существующие препараты бруцеллёзных вакцин [2][8 – 10], в том числе российского производства на основе штамма B. abortus 19-ВА, нельзя считать безопасными.

Нигде в мире, кроме СССР, Китая и Монголии, вакцинация людей против бруцеллёза не проводилась [11][12]. Причинами отказа большинства государств от вакцинации людей с использованием живых бруцеллёзных вакцин были полученные результаты сравнительных клинических испытаний безвредности, реактогенности и иммунологической эффективности препаратов бруцеллёзных вакцин на основе штаммов B. abortus 19-ВА и B. melitensis Rev-1.

В СССР в 50-е гг., в период обширной эпизоотии бруцеллёза, вакцинопрофилактика у людей (вакцинация – с 1952 г., ревакцинация – с 1956 г.) сыграла значительную роль в снижении заболеваемости. К 1964 г. количество новых случаев заболеваний снизилось в шесть раз. В дальнейшем, несмотря на увеличение объёма прививок, заболеваемость людей не снижалась, вследствие чего объёмы вакцинации среди населения в ряде регионов были ограничены [11]. Большой вклад в исследование специфической профилактики бруцеллёза внесли сотрудники Ростовского-на-Дону противочумного института (Г.А. Баландин, И.И. Поляков, Н.П. Простетова, М.С. Дрожевкина, В.С. Уралёва и другие). На базе бруцеллёзного отдела института было организованно производство препарата «бруцеллин», широко применяемого в практике при постановке аллергической пробы Бюрне. Было показано, какой большой вред приносит ревакцинация, проводимая без предварительного серологического обследования. Сокращение объёмов иммунопрофилактики, особенно многократной ревакцинации, было продиктовано необходимостью уменьшения побочного действия вакцины. Результаты проведённых исследований впоследствии привели к существенным изменениям в инструкции по профилактике бруцеллёза у людей с помощью вакцинного штамма B. abortus 19-ВА [13].

В 90-е гг. экономические трудности в нашей стране привели к сокращению объёмов иммунопрофилактики бруцеллёза у людей в 6 – 7 раз. В среднем за год иммунизировали против бруцеллёза 1100 – 1300 человек. В период с 2003 по 2005 гг. вакцинацию контингентов риска проводили только в нескольких субъектах России (республика Калмыкия, Алтай, Бурятия; Ростовская, Оренбургская и Иркутская области). В других неблагополучных по бруцеллёзу субъектах, таких как Ставропольский край, Республика Хакасия, Карачаево-Черкесская Республика, где отмечается высокий процент «профессионального» бруцеллёза, иммунизацию не проводили6.

В настоящее время вакцинация против бруцеллёза в Российской Федерации входит в календарь прививок по эпидемическим показаниям и проводится в соответствии с действующими нормативными документами при угрозе заражения бруцеллёзом МРС в очагах козьеовечьего типа7. О проведении специфической профилактики среди людей в очаге бруцеллёза МРС решение принимают специалисты территориальных учреждений Роспотребнадзора с учётом данных ветеринарной службы.

В соответствии с СП3.1.7.2613-10 «Профилактика бруцеллёза» у людей специфическая профилактика этого заболевания проводится в случае повышенного риска заражения наиболее патогенным для человека штаммом B. melitensis. Плановой вакцинации подвергаются лица, достигшие 18 лет, из групп профессионального риска, а также лица, выполняющие работы по заготовке, хранению, обработке сырья и продуктов животноводства, полученных из хозяйств, где регистрируются заболевания скота бруцеллёзом, по убою скота, больного бруцеллёзом, заготовке и переработке полученных от него мяса и мясопродуктов, а также животноводы, ветеринарные работники, зоотехники в хозяйствах, энзоотичных по бруцеллёзу; работники бактериологических лабораторий, работающих с живыми культурами8. Вакцинацию постоянным и временным работникам, занятым в животноводстве, проводят по эпидемическим показаниям до тех пор, пока не перестанут регистрироваться в хозяйствах случаи бруцеллёза козье-овечьего вида среди животных (как мелкого, так и крупного рогатого скота), а персоналу предприятий по переработке сырья и продуктов животноводства – пока не перестанут регистрироваться случаи бруцеллёза в хозяйствах, откуда поступает скот, сырьё и продукты животноводства. В районах, свободных от бруцеллёза козье овечьего вида, иммунизация персонала хозяйств, неблагополучных по бруцеллёзу, вызванному B. abortus, B. suis, B. canis, не проводится.

Тактика специфической профилактики бруцеллёза у людей осталась прежней. Однако за последние 30 лет среди заболевших увеличилась доля лиц, профессионально не связанных с животноводством (70% – владельцы скота, 30% – иной контингент) [14], а их плановая вакцинация по эпидпоказаниям действующей документацией не предусматривается6.

В отечественной литературе приводятся критические данные в адрес применяемой у нас в стране вакцины для иммунизации людей. Высказывается мнение о невысокой иммунологической и эпидемиологической эффективности вакцинного препарата и возможных побочных эффектах и осложнениях, сопровождающих его применение9 [11][15]. Описаны случаи формирования вакцинальной патергии у людей, привитых живой бруцеллёзной вакциной с нарушением требований инструкции по применению препарата [11][16]. Отмечено, что в связи с низкой иммуногенностью вакцины, приготовленной из вакцинного штамма B. abortus 19-ВА, и недостаточной длительностью поствакцинального иммунитета (до 6 мес.) при планировании иммунизации контингента риска важно учитывать сроки начала массовых животноводческих работ6.

Для иммунизации животных против бруцеллёза в Российской Федерации в настоящее время наиболее часто применяются вакцины на основе штаммов B. abortus 19, B. abortus 82, B. abortus 75/79-АВ (производства ФКП «Щелковский биокомбинат», Россия) и вакцина против бруцеллёза овец и коз и инфекционного эпидидимита баранов из штамма B. melitensis Rev-1 (ООО «Агровет», Россия).

Живые аттенуированные вакцины для иммунизации животных достаточно широко применяют и за рубежом [17 – 19]. С этой целью используют в основном вакцины на основе S-штаммов B. abortus S 19, B. melitensis Rev-1 и R-форм бруцелл B. abortus RB-51 [20 – 22].

Долгое время для оздоровления от бруцеллёза крупного рогатого скота за рубежом, в том числе и в республике Казахстан [23], использовали вакцину из неагглютиногенного штамма В. abortus RB-51, производства США. Данный штамм был получен из патогенного штамма В. abortus 2803 путем серии пассажей на питательных средах с рифампицином [24]. Позднее в литературе появились данные, указывающие на опасность данной вакцины. Так, в 2017 – 2018 гг. в США в штатах Техас, Нью-Джерси и Пенсильвания были обнаружены случаи заболевания людей бруцеллёзом, напрямую связанные с употреблением непастеризованного молока от коров, иммунизированных живой вакциной на основе штамма B. abortus RB-51[25].

Последние десятилетия исследования многих учёных были посвящены созданию вакцин на основе очищенных поверхностных или внутриклеточных белков (пептидов) Brucella spp. [26][27]. Иммунодоминантные белки Brucella spp., включая белки наружной мембраны (Omp16, Omp19, Omp25, Omp28, Omp31), рибосомный белок L7/L12, рассматриваются в качестве основы для создания субъединичных вакцин [27 – 30]. Анализ мировых разработок новых вакцин против бруцеллёза показал, что для создания наиболее эффективных препаратов в основном используют иммуногенные мембранные пептиды бруцелл Omp31 и Omp22, играющие также роль в вирулентности, и регуляторный железосодержащий белок Frp B [31].

Зарубежными исследователями разрабатываются вакцины для иммунизации людей и животных на основе векторных (генно-инженерных) препаратов с использованием Lactococcus lactis и вируса гриппа. Изучена эффективность рекомбинантного L. lactis, секретирующего супероксиддисмутазу B. abortus, при введении отдельно или в комбинации с L. lactis, продуцирующим IL-12. При пероральной вакцинации мышей в различных вариациях выявлено наличие специфических антител, позволяющих защитить животное от заражения вирулентным штаммом В. abortus 2308 [32][33]. Учёные работают над созданием кандидатных вакцин, состоящих из вирусов гриппа А подтипа Н5N1 и H1N1, экспрессирующих рибосомный белок бруцеллы L7/L12 и Omp16. Данная вакцина рекомендована для вакцинации крупного рогатого скота. Кроме этого, ведутся исследования по созданию эффективного векторного препарата для вакцинации людей. Использован рекомбинантный вектор вируса гриппа (rIVV) подтипа H5N1, экспрессирующего аминокислоты белков внешней мембраны Brucella Omp 16 и 19, рибосомных L7/L12 и белков Cu/Zn супероксиддисмутазы. Исследуя 18 комбинаций, моно-, би- и четырёхвалентных вакцин, определили наиболее эффективную комбинацию [34 – 36].

Китайскими учёными предложена живая вакцина на основе мутантного штамма В. melitensis M5-90 man B (M5-90ΔmanB). Испытания препарата показали, что штамм индуцирует в эксперименте формирование выраженного и устойчивого иммунного ответа, не вызывает выработку агглютининов и защищает животных от заболевания бруцеллёзом при инфицировании их высоко вирулентным штаммом B. melitensis 16 M [37].

Другими исследователями предложена живая аттенуированная вакцина на основе мутантного штамма B. abortus 2308 (2308ΔgntR), который индуцирует высокую степень защиты у животных [38].

Российские исследователи провели эксперименты по конструированию и применению инактивированной сплит-конъюгированной вакцины для вакцинации мелкого рогатого скота [39]. В ходе проведённых исследований установлена высокая иммуногенность данной вакцины в отношении коз, что позволит эффективно использовать её в борьбе с бруцеллёзом этого вида животных. С целью усиления иммуногенности для овец авторы рекомендуют применение иммунопротекторов, способных усиливать гуморальный иммунный ответ этих животных на введённый антиген испытуемой вакцины.

Также продолжаются исследования, направленные на совершенствование схем иммунизации животных, ранее разработанными вакцинами. Отработана возможность купирования бруцеллёза в острых очагах с применением вакцины из штамма B. abortus 82 [3]. Предложена схема вакцинации и ревакцинации крупного рогатого скота с использованием штаммов B. abortus 19 и 82 [40]. Доказана эффективность двухэтапного способа иммунизации крупного рогатого скота против бруцеллёза при оздоровлении индивидуальных хозяйств. Использование бруцеллёзного R-антигена в реакции связывания комплемента позволяет легко дифференцировать больных от вакцинированных животных [41]. Показана целесообразность применения перед иммунизацией антибактериального препарата «Нитокс-200» в неблагоприятных по бруцеллёзу стадах крупного рогатого скота, благодаря которому оздоровление животных происходит уже через четыре месяца [42]. Разработана концепция оптимизации использования слабоагглютиногенных штаммов B. abortus 75/79-АВ и 82 для иммунизации северных оленей [43]. Повышена эффективность специфической профилактики бруцеллёза северных оленей за счёт определения оптимальных доз вакцины из штаммов B. abortus 19 и 82 [44]. Кроме этого разработана схема вакцинации и оздоровления от бруцеллёза неблагополучного стада верблюдов с использованием вакцинного штамма B. abortus 75/79-АВ [45]. Исследователи составили алгоритм специфических мероприятий, обеспечивающих оптимальную защиту от бруцеллёза, куда входит применение инактивированного иммуногена, высокоагглютиногенного у молодняка крупного рогатого скота и низкоагглютиногенного у взрослых животных; проведение специфической противобруцеллёзной иммунизации не ранее чем через три месяца после иммунозначимых событий (противопаразитарная обработка, иммунизация от других инфекций и т. д.) [46].

Кроме того, российские и зарубежные авторы показали, что на эффективность вакцин влияет способ их введения в организм: внутрибрюшинная и подкожная вакцинация намного эффективнее для защиты от аэрозольной бруцеллёзной инфекции, чем интраназальная вакцинация [18]. Другие исследователи установили эффективность конъюнктивального метода вакцинации, наличие в слизистой оболочке конъюнктивы глаза развитой сети лимфатических сосудов и рецепторов мобилизует и активизирует функции мононуклеарно-фагоцитарной системы, антиген по слёзно-носовому каналу проникает в носовую полость (увеличивается площадь всасывания) [42][47][48].

Совершенствование специфической профилактики бруцеллёза является одной из важнейших задач как для здравоохранения, так и для ветеринарии, учитывая тот факт, что бруцеллёз является инфекцией, общей для человека и сельскохозяйственных животных. Бруцеллёзная инфекция наносит серьезный вред здоровью граждан, профессионально занятых в получении и переработке животноводческого сырья, а также имеющих в подсобных хозяйствах скот, заболеваемость бруцеллёзом сельскохозяйственных животных приводит к значительным экономическим потерям в животноводческих хозяйствах.

Несмотря на полувековую историю разработок вакцин против бруцеллёза и наличие перспективных научных исследований в последние десятилетия, коммерческих препаратов, полностью безопасных для иммунизации людей и животных, обладающих длительной эффективностью, до настоящего времени не создано. Существующая система несовершенна, вакцины имеют остаточную вирулентность и требуют доработок, что и определяет перспективность дальнейших разработок в этом направлении [49].

В то же время вакцинация, являющаяся основным фактором защиты от заражения бруцеллёзом животных, не может обеспечить полный контроль над инфекцией. Одной из главных задач поствакцинального мониторинга бруцеллёза и обеспечения эпизоотического и эпидемиологического благополучия касательно данной инфекции остаётся разработка средств и методов дифференциации вакцинированного от инфицированного. В связи с этим продолжения требуют работы российских учёных по усовершенствованию поствакцинальной диагностики бруцеллёза, а также эксперименты по разработке систем профилактических и оздоровительных мероприятий от бруцеллёза крупного и мелкого рогатого скота [50 – 54].

1. https://www.snipchi.ru/updoc/2021/EPID_OBZOR_BRUZ_2020_2021.pdf дата обращения 5.05.2021 г. 2. https://www.who.int/ru/news-room/fact-sheets/detail/brucellosis дата обращения 13.05.2021 3. Приказ Минсельхоза России от 08.09.2020 № 533 «Об утверждении Ветеринарных правил осуществления профилактических, диагностических, ограничительных и иных мероприятий, установления и отмены карантина и иных ограничений, направленных на предотвращение распространения и ликвидацию очагов бруцеллёза (включая инфекционный эпидидимит баранов)» (Зарегистрировано в Минюсте России 15.09.2020 N 59869). 4. Постановление Главного государственного санитарного врача РФ от 28.01.2021 № 4 «Об утверждении санитарных правил и норм СанПин 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования пр профилактике инфекционных болезней». 5. Вершилова П.А. Федер М.Л., Полякова А.М. Прививки людей против бруцеллёза живой вакциной // Вопросы инфекционной патологии и иммунологии: тр. АМНСССР. – Т. 2. –М., 1954. – С. 231. 6. Желудков М.М. Бруцеллёз в России: современная эпидемиология и лабораторная диагностика: Автореф. дис. ... д-ра мед. наук / Желудков Михаил Михайлович.- Москва, 2009 – 52с. 7. Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 21 марта 2014 года № 125н «Об утверждении Национального календаря профилактических прививок и календаря профилактических прививок по эпидемическим показаниям» (с изменениями на 3 февраля 2021 года). 8. Постановление Главного государственного санитарного врача РФ от 26.04.2010 № 39 «Об утверждении СП 3.1.7.2613- 10» (вместе с «СП 3.1.7.2613-10. Профилактика бруцеллеза. Санитарно-эпидемиологические правила»). 9. Цирельсон Л.Е. Клинико-иммунологические особенности бруцеллеза на фоне специфической вакцинации: Автореф. дис. ... д-ра мед. наук / Цирельсон Людмила Екимовна. – Алма-Ата, 1992 – 38 с.