mvjrМедицинский вестник Юга РоссииMedical Herald of the South of Russia2219-80752618-7876The Rostov State Medical University10.21886/2219-8075-2019-10-3-mvjr-930Research ArticleОБМЕН ОПЫТОМEXPERIENCE EXCHANGEСовременные проблемы антибиотикорезистентности грамотрицательных возбудителей нозокомиальных инфекций в Ростовской областиModern problems of antibiotic resistance gram-negative nosocomial infections in the Rostov regionКуцеваловаО. Ю.KutsevalovaO. Yu.

Куцевалова Ольга Юрьевна - к.б.н., заведующая лабораторией клинической микробиологии, врач-бактериолог.

Olga Yu Kutsevalova - PhD Head of the laboratory of clinical Microbiology, bacteriologist.

Olga_Kutsevalova@mail.ruПокудинаИ. О.PokudinaI. O.

Покудина Инна Олеговна - к.б.н., старший научный сотрудник лаборатория «Биомедицина».

Inna O. Pokudina - PhD Senior Researcher laboratory «Biomedicine».

РозенкоД. А.RozenkoD. A.

Розенко Дмитрий Александрович - заведующий отделением, врач анестезиолог реаниматолог.

Dmitry A. Rozenko - Head of department, anesthesiologist.

Rostov-on-Don

МартыновД. В.MartynovD. V.

Мартынов Дмитрий Викторович - к.м.н., заведующий Отделением анестезиологии и реанимации №1.

Dmitry V. Martynov - PhD Head of the department of anesthesiology and resuscitation N1.

КаминскийМ. Ю.KaminskyM. Yu.

Каминский Михаил Юрьевич - к.м.н., заведующий отделением анестезиологии-реанимации №7, врач анестезиолог реаниматолог.

Mikhail Yu Kaminsky - PhD, Head of the department of anesthesiology-resuscitation N7, anesthesiologist, resuscitation specialist.

Ростовский научно-исследовательский онкологический институтRostov Research Institute of OncologyЮжный федеральный университетРоссияSouthern Federal UniversityRussian FederationРостовский государственный медицинский университетRussian FederationRostov state medical UniversityRussian FederationГородская Больница Скорой Медицинской ПомощиRussian FederationCity hospital of emergency medical careRussian Federation2019111020191039196Copyright © Куцевалова О.Ю., Покудина И.О., Розенко Д.А., Мартынов Д.В., Каминский М.Ю., 20192019Куцевалова О.Ю., Покудина И.О., Розенко Д.А., Мартынов Д.В., Каминский М.Ю.Kutsevalova O.Y., Pokudina I.O., Rozenko D.A., Martynov D.V., Kaminsky M.Y.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.medicalherald.ru/jour/article/view/930Цель

Цель: провести анализ распространенности штаммов грамотрицательных бактерий - возбудителей инфекционных осложнений, устойчивых к карбапенемам, в том числе, за счет продукции карбапенемаз, выделенных из различного клинического биоматериала у госпитализированных пациентов стационаров города Ростова-на-Дону и области.

Материалы и методы

Материалы и методы: исследовали 366 грамотрицательных бактериальных изолятов, пациентов из 16 отделений 9 лечебно-профилактических стационаров г. Ростова-на-Дону и области. Изоляты выделяли традиционным микробиологическим методом. Видовую идентификацию штаммов и чувствительность к антимикробным препаратам определяли на автоматическом анализаторе Vitek 2 (BioMerieux, Франция). Нечувствительные к карбапенемам штаммы тестировали на наличие карбапенемаз с помощью CIM-теста. МБЛ выявляли по эффекту подавления их активности в присутствии ЭДТА. Гены МБЛ детектировали ПЦР-РВ тест-наборами «АмплиСенс MDR MBL-FL», «АмплиСенс MDR KPC/OXA-48-FL». Вывод о продукции БЛРС делали по наличию синергизма цефалоспоринов III-IV поколения с клавулановой кислотой методом двойных дисков.  

Результаты

Результаты: из 366 исследованных изолятов грамотрицательные бактерии составили 74,2%. Из них: Klebsiella pneumoniae 33,0%, ‎Escherichia coli 19,0%, Acinetobacter baumannii 18,0%, Pseudomonas aeruginosa 15,0%. Резистентность к карбапенемам обнаружена у 90,9% штаммов  A.baumannii, более 50% P.aeruginosa и  K.pneumoniae. Продукция БЛРС детектирована у более чем 90 % K.pneumoniae и около 80 % E.coli. У изолятов A.baumannii и K.pneumoniae было выявлено наличие генов группы OXA и NDM, у P.aeruginosa группы VIM.

Заключение

Заключение: энтеробактерии устойчивые к бета-лактамам, продуцирующие бета-лактамазы расширенного спектра и карбапенемазы являются одними из ведущих возбудителей инфекционных осложнений в стационарах Ростова-на-Дону и области, практически не уступая по частоте встречаемости бактериям рода Acinetobacter spp. и P.aeruginosa. Это определяет важность детекции механизмов резистентности не только для назначения оптимальной этиотропной терапии, но и для эпидемиологического контроля распространения резистентных штаммов и разработки мероприятий инфекционного контроля.

Objectives

Objectives: to analyze the prevalence of strains of gram-negative bacteria - pathogens of infectious complications resistant to carbapenems, including through the production of carbapenemases isolated from various clinical biomaterials in hospitalized patients of hospitals in the city of Rostov-on-Don.

Materials and methods

Materials and methods: 366 gram-negative bacterial isolates were studied, from patients from 16 wards, 9 treatment-and-prophylactic institutions of the city of Rostov-on-Don and the region. The study was conducted by traditional microbiological method. Species identification of strains and sensitivity to antimicrobial drugs were determined on a Vitek 2 automatic analyzer (BioMerieux, France). The strains insensitive to carbapenems were tested for the presence of carbapenemases using CIM-test. MBL was detected by the effect of suppression of their activity in the presence of EDTA. MBL genes were detected by PCR-RV test kit “AmpliSens MDR MBL-FL”, “AmpliSens MDR KPC/OXA-48-FL”. The conclusion about the production of BLRS was made by the presence of synergism of cephalosporins of III-IV generation with clavulanic acid by the method of double discs.

Results

Results: of the 366 isolates tested, gram-negative bacteria accounted for 74.2 %: Klebsiella pneumoniae — 33.0 %, Escherichia coli — 19.0 %, Acinetobacter baumannii — 18.0 %, Pseudomonas aeruginosa — 15.0 %. Resistance to carbapenems was detected in 90.9 % of A.baumannii strains, more than 50 % of P.aeruginosa and K.pneumoniae. LBR production was detected in more than 90 % of K.pneumoniae and about 80 % of E. coli. In A. baumannii and K.pneumoniae isolates, the presence of OXA and NDM genes was found, and in P.aeruginosa, VIM groups.

Conclusion

Conclusion: enterobacteria resistant to beta-lactams, producing extended-spectrum beta-lactamases and carbapenemases are one of the leading causative agents of infectious complications in hospitals of Rostov-on-don and the region, almost not inferior in frequency of occurrence of bacteria of the genus Acinetobacter spp. and Paeruginosa. This determines the importance of detection of resistance mechanisms not only for the purpose of optimal etiotropic therapy, but also for epidemiological control of the spread of resistant strains and the development of infection control measures.

антибиотикорезистентностьграмотрицательные бактерииβ-лактамыкарбапенемазыantibiotic resistancegram-negative bacteriaβ-lactamscarbapenemasesReferencesШаталова Е.В., Парахина О.В., Красноухов А.И. Значимость микробиологического мониторинга в современной системе профилактики инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи // Антибиотики и химиотерапия. - 2017. - Т. 62. № 11-12. - С. 35-38.Shatalova EV, Parakhina OV, Krasnoukhov AI. The significance of microbiological monitoring in the modern system of prevention of infections associated with the provision of medical care. Antibiotics and chemotherapy. 2017;62(11-12):35-38. (in Russ.)Вильямс Д. Резистентность к бета-лактамным антибиотикам // Антибиотики и химиотерапия. – 1997. – Т. 42, № 10. – С. 5-9.Williams D. Resistance to beta-lactam antibiotics. Antibiotics and chemotherapy. 1997;42(10):5-9. (in Russ.)Яковлев С.В. Оптимизация эмпирической антибактериальной терапии госпитальных инфекций, вызванных грамотрицательными микроорганизмами //РМЖ. - 2005. – №5. – C. 278Yakovlev SV. Optimization of empirical antibacterial therapy of nosocomial infections caused by gram-negative microorganisms. RMJ. 2005;(5):278. (in Russ.)Бисекенова А.Л., Адамбеков Д.А., Рамазанова Б.А., Чакемова Г.С. Этиологическая структура инфекций, вызванных грамотрицательными микроорганизмами в хирургический стационарах г. Алматы и профиль их антибиотикорезистентности // Вестник КГМА им. И.К. Ахунбаева. - 2016. - № 4. - С. 120-124.Bisekenova AL, Adambekov DA, Ramazanova BA, Chakemova GS. The etiological structure of infections caused by gram-negative microorganisms in surgical hospitals in Almaty and the profile of their antibiotic resistance. Bulletin of the KSMA I.K. Akhunbaeva. 2016;4:120-124. (in Russ.)Витик А.А., Суханова Н.В., Пыленко Л.Н. Этиология и антибиотикорезистентность возбудителей нозокомиальных инфекций в гнойно-септическом отделении анестизиологии и реанимации // Университетская медицина Урала. - 2017. - Т. 3. № 2 (9). - С. 40-44.Vitik AA, Sukhanova NV, Pylenko LN. Etiology and antibiotic resistance of pathogens of nosocomial infections in the purulent-septic department of anesthesiology and intensive care. University Medicine of the Urals. 2017;3(9):40-44. (in Russ.)Куцевалова О.Ю., Кит О.И., Панова Н.И., Розенко Д.А., Якубенко C.В., Геворкян Ю.А Современные тенденции антибиотикорезистентности грамотрицательных возбудителей нозокомиальных инфекций в Ростовской области // Антибиотики и химиотерапия. - 2018.- 63. - С.11—12Kutsevalova OYu, Kit OI Panova NI, Rozenko DA, Yakubenko SV, Gevorkyan YuA. Current trends in antibiotic resistance of gram-negative pathogens of nosocomial infections in the Rostov region. Antibiotics and chemotherapy. 2018;63:11—12. (in Russ.)Крыжановская О.А. Чувствительность к антибиотикам и механизмы устойчивости к карбапенемам Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa и Klebsiella pneumoniae, выделенных у детей в отделениях реанимации и интенсивной терапии: Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. Москва, 2016.- 119 с.Kryzhanovskaya OA. Antibiotic susceptibility and carbinem resistance to Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa and Klebsiella pneumoniae, isolated from children in the intensive care unit. Abstract of thesis for the degree of candidate of medical sciences. Moscow; 2016. (in Russ.)8. Покудина И.О., Коваленко К.А. Распространенность и вклад в антибиотикоустойчивость β-лактамаз у амбулаторных изолятов Klebsiella pneumoniae // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2016. - №12. - С.295-298Pokudina IO, Kovalenko KA. The prevalence and contribution to the antibiotic resistance of β-lactamase in Klebsiella pneumoniae ambulatory isolates. International Journal of Applied and Fundamental Research. 2016;(12):295-298. (in Russ.)Эйдельштейн М.В., Сухорукова М.В., Склеенова Е.Ю., Иванчик Н.В., Микотина А.В., и др. Антибиотикорезистентность нозокомиальных штаммов Pseudomonas aeruginosa в стационарах России: результаты многоцентрового эпидемиологического исследования «МАРА- ФОН» 2013-2014. // Клиническая микробиология антимикробная химиотерапия. - 2017. – Т. 19.№1. - С.37-41.Eidelstein MV, Sukhorukova MV, Skleenova EYu, Ivanchik NV, et al. Antibiotic resistance of nosocomial strains of Pseudomonas aeruginosa in hospitals in Russia: results of the MARAFON 2013-2014 multicenter epidemiological study. Clinical microbiology, antimicrobial chemotherapy. 2017;19(1):37-41. (in Russ.)Эйдельштейн М.В., Сухорукова М.В., Склеенова Е.Ю., Иванчик Н.В., Микотина А.В., и др. Антибиотикорезистентность нозокомиальных штаммов Enterobacteriaceae в стационарах России: результаты многоцентрового эпидемиологического исследования «МАРАФОН» 2013- 2014. // Клиническая микробиология антимикробная химиотерапия. - 2017.- Т. 19. - № 1. - С.49-56.Eidelstein MV, Sukhorukova MV, Skleenova EYu, Ivanchik NV, Mikotina AV, et al. Antibiotic resistance of nosocomial strains of Enterobacteriaceae in hospitals in Russia: the results of a multicenter epidemiological study “MARATHON” 2013-2014. Clinical microbiology, antimicrobial chemotherapy. 2017;19(1):49-56. (In Russ.)Antimicrobial resistance surveillance in Europe 2011. Surveillance report http://www.ecdc.europa.eu/en/publications/Publications/antimicrobial-resistancesurveillance-europe-2011Antimicrobial resistance surveillance in Europe 2011. Surveillance report http://www.ecdc.europa.eu/en/publications/Publications/antimicrobial-resistancesurveillance-europe-2011Gupta N., Limbago B.M., Patel J.B., Kallen A.J. Carbapenemresistant Enterobacteriaceae: epidemiology and prevention // Clin Infect Dis. - 2011. – V.53. - P. 60-67.Gupta N, Limbago BM, Patel JB, Kallen AJ Carbapenemresistant Enterobacteriaceae: epidemiology and prevention. Clin Infect Dis. 2011;53:60-67.Breidenstein E.B., de la Fuente-Nunez C., Hancock R.E. Pseudomonas aeruginosa: all roads lead to resistance //Trends Microbiol. - 2011. – V.19(8). - P.419-426.Breidenstein EB, de la Fuente-Nunez C, Hancock RE. Pseudomonas aeruginosa: all roads lead to resistance. Trends Microbiol. 2011;19(8):419-426.Mulvey M.R., Grant J.M., Plewes K., Roscoe D., Boyd D.A. New Delhi metallo-β-lactamase in Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli, Canada // Emerg. Infect. Dis. — 2011. — Vol. 17, N 1. — P. 103–106.Mulvey MR, Grant JM, Plewes K, Roscoe D, Boyd DA. New Delhi metallo-β-lactamase in Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli, Canada. Emerg. Infect. Dis. 2011;17(1):103–106.Егорова С.А, Кафтырева Л.А., Л.В. Липская Л.В. Штаммы энтеробактерий, продуцирующие бета-лактамазы расширенного спектра и металло- β-лактамазу NDM-1, вы- деленные в стационарах в странах балтийского региона // Инфекция и иммунитет. - 2013. - Т. 3. - № 1.- C. 29–36.Yegorova SA, Kaftyreva LA, Lipskaya LV. Enterobacteria cellsКлинические рекомендации «Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам» Вер. 2015-02. Доступно по URL: http://www.antibiotic.ru/minzdrav/files/docs/clrec-dsma2015.pdfthat produce extended-spectrum beta-lactamase and metal- β-lactamase NDM-1, isolated in hospitals in the Baltic region countries. Infection and immunity. 2013;3(1):29–36. (in Russ.)van der Zwaluw K., de Haan A., Pluister G.N., Bootsma H.J., de Neeling A.J., Schouls L.M. The Carbapenem inactivation method (CIM), a simple and lowcost alternative for the Carba NP test to assess phenotypic carbapenemase activity in Gram-negative rods. // PLOS One. – 2015. – V.10: e0123690.Clinical recommendations “Determination of the sensitivity of microorganisms to antimicrobial drugs” Ver. 2015-02. Available at URL: http://www.antibiotic.ru/minzdrav/files/docs/clrec-dsma2015.pdfMa B., Fang C., Lu L., Wang M., Xue X.Y. et al. The antimicrobial peptide thanatin disrupts the bacterial outer membrane and inactivates the NDM-1 metallo-β-lactamase. // Nature Communications. 10. doi: 10.1038/s41467-019-11503-3.van der Zwaluw K, de Haan A, Pluister GN, Bootsma HJ, de Neeling AJ, Schouls LM. The Carbapenem inactivation method (CIM), a simple and lowcost alternative for the Carba NP test to assess phenotypic carbapenemase activity in Gramnegative rods. PLOS One. 2015;10: e0123690.Козлов Р.С., Стецюк О.У., Андреева И.В. Цефтазидим-авибактам: новые «правила игры» против полирезистентных грамотрицательных бактерий // Клин микробиология антимикробная химиотерапия.- 2018.- Т. 20.- №1 С.3-14Ma B., Fang C., Lu L., Wang M., Xue X.Y. et al. The antimicrobial peptide thanatin disrupts the bacterial outer membrane and inactivates the NDM-1 metallo-β-lactamase. Nature Communications. 10. doi: 10.1038/s41467-019-11503-3.Соломенный А.П., Зубарева Н.А., Гончаров А.Е. Генотипический анализ нозокомиальных штаммов Acinetobacter baumannii // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2015. - Т. 17. - № 4. - С. 297-300.Kozlov RS, Stetsyuk OU, Andreeva IV. Ceftazidim-avibakam: new “rules of the game” against multidrug-resistant gramnegative bacteria. Wedge microbiology, antimicrobial chemotherapy. 2018;20(1):3-14. (in Russ.)Solomenny AP, Zubareva NA, Goncharov AE. Genotypic analysis of nosocomial Acinetobacter baumannii strains. Clinical Microbiology and Antimicrobial Chemotherapy. 2015;17(4):297-300. (in Russ.)Solomenny AP, Zubareva NA, Goncharov AE. Genotypic analysis of nosocomial Acinetobacter baumannii strains. Clinical Microbiology and Antimicrobial Chemotherapy. 2015;17(4):297-300. (in Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.